У грудні 2019 року з міста Ухань, провінція Хубей та незабаром поширився на більшість провінцій і міст Китаю та багатьох інших країн у січні 2020 року. Станом на 22:00 27 січня в Китаї було зареєстровано 28 підтверджених випадків та 5794 підозри на 2019-nCov. TheДжерело інфекції вірусу було визначено як Rhinolophus, і нинішня смертність становить 2,9%.
12 січня 2020 року Всесвітня організація охорони здоров’я (ВООЗ) оголосила, що епідемію пневмонії спричинив новий тип коронавірусу (2019-nCov). Коронавірус - це своєрідний вірус, який поширюється серед тварин. Тип нуклеїнової кислоти вірусу-одноланцюгова РНК. В той же час, ВООЗ також оприлюднила інформацію про послідовність нуклеїнових кислот nCov, якою поділилися китайські вчені, що забезпечило основу молекулярного виявлення для виявлення вірусу та зробило можливим швидке виявлення та ідентифікацію патогенів.
ВООЗ пропонує, щоб люди, які мають гострі респіраторні захворювання, такі як кашель, лихоманка, інфекція дихальних шляхів і були в Ухані протягом 14 днів або були піддані контакту з іншими пацієнтами, повинні проходити комплексне обстеження. 17 січня 2020 року ВООЗ опублікувала "Лабораторне тестування на новий коронавірус 2019 року (2019-nCoV) у підозрюваних людських випадках, Тимчасове керівництво, 17 січня 2020 року". У керівництві вказується, що до зразків, які необхідно відібрати у пацієнтів з симптомами хвороби, належать зразки дихання (мазки з носоглотки та ротоглотки, мокрота, бронхоальвеолярне промивання тощо) та зразки сироватки крові:
*Для транспортування зразків для виявлення вірусів використовуйте VTM (транспортний носій вірусу), що містить протигрибкові та антибіотичні добавки. Для бактеріальної або грибкової культури транспортуйте в сухому вигляді або в дуже невеликій кількості стерильної води. Уникайте повторного заморожування та розморожування зразків.
Крім конкретних матеріалів для збору, зазначених у таблиці, також запевняйте, що доступні інші матеріали та обладнання: наприклад, транспортні контейнери та мішки для збору зразків та упаковка, охолоджувачі та холодні пакети або сухий лід, стерильне обладнання для забору крові (наприклад, голки, шприци та туби), етикетки та постійні маркери, ЗІЗ, матеріали для знезараження поверхонь.
Для виявлення вірусу зразки сироватки можуть бути використані для виявлення вірусу імунологічним методом, тоді як RTqPCR рекомендується для виявлення нуклеїнової кислоти nCov для більш швидкого та точного виявлення. Як вірус
Послідовність відома, вміст вірусної нуклеїнової кислоти у зразку можна швидко визначити лише
вибір відповідних реагентів та відповідних праймерів
(Діагностичне виявлення коронавірусу Ухань 2019 за методом RTPCR в режимі реального часу, протокол та попередня оцінка станом на 13 січня 2020 р.) Будучи лідером у галузі вилучення та виявлення нуклеїнових кислот у Китаї, TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD. надав реагенти для виявлення вірусу «рука-нога-рот» та вірусів грипу А (H1N1) для більш ніж 10 мільйонів людей. У 2019 році реагенти для вилучення та виявлення нуклеїнових кислот вірусу TIANGEN були застосовані до 30 мільйонів зразків африканської класичної чуми свиней, зробивши видатний внесок у діагностику та профілактику африканської класичної чуми свиней у Китаї. TIANGEN не тільки забезпечує швидкі та точні реактиви для вилучення та виявлення вірусів, але також пропонує зручні та ефективні інструменти для подрібнення тканин та автоматичні екстрактори нуклеїнових кислот, які складають повний набір рішень для вилучення та виявлення вірусів.
Автоматизований розчин для вилучення нуклеїнової кислоти
Автоматизовані екстрактори нуклеїнових кислот TIANGEN - це автоматичні платформи для вилучення нуклеїнових кислот методом магнітних кульок. Застосування цих платформ не тільки значно зменшує навантаження відділів інспекції та карантину, але також зменшує операційні помилки ручного вилучення та забезпечує послідовність та стабільність якості видобутої нуклеїнової кислоти.
Автоматизований екстрактор нуклеїнових кислот TIANGEN має різну продуктивність (включаючи 16, 24, 32, 48, 96 каналів), а відповідні реактиви можуть бути використані для вилучення нуклеїнових кислот з різних типів зразків. TIANGEN також надає індивідуальні послуги з розробки реагентів та інтеграції інструментів відповідно до різних експериментальних вимог.
TGrinder H24 тканинний гомогенізатор
● Широко використовується для подрібнення та гомогенізації різних зразків тканин та калу
● З силою гомогенізації подрібнення в 2-5 разів більшою, ніж у традиційних інструментів
● Рівномірне подрібнення та гомогенізація, що дозволяє уникнути перехресного забруднення
● Пристрій автоматичного захисту для захисту персоналу лабораторії
Автоматичний екстрактор нуклеїнової кислоти TGuide S32
● Вибірка: 1-32 вибірки
● Об'єм обробки: 20-1000 мкл
● Тип зразка: кров, клітини, тканини, кал, вірус та інші зразки
● Час обробки: До 8 хвилин для отримання вірусної нуклеїнової кислоти
● Режим керування: Режим подвійного управління Windows Pad та екранної кнопки
● Розробка платформи: відкрита платформа, безкоштовна для відповідності реагентам
● Комплект магнітно -вірусної ДНК/РНК TGuide S32 (DP604)
● Широке застосування: високоякісну ДНК/РНК вірусу можна очистити із сироватки, плазми, зразка мазка, розчину для обробки тканин та різних розчинів для збереження вірусу.
● Простий та ефективний: Цей продукт ідеально поєднується з автоматичним екстрактором нуклеїнових кислот TGuide S32, який може витягати ДНК/РНК вірусу з високим виходом, високою чистотою, стабільною та надійною якістю.
● Подальші застосування: Очищена нуклеїнова кислота підходить для подальших експериментів з ПЛР вірусу та ПЛР у реальному часі.
Розчин для екстракції нуклеїнової кислоти вручну
Як лідер у галузі вилучення та виявлення нуклеїнових кислот, TIANGEN володіє найповнішою серією продуктів екстракції нуклеїнових кислот у Китаї, які ідеально підходять для виявлення коронавірусу з усіх видів зразків: крові, сироватки/плазми, тканин, мазків, вірусів тощо.
Набір ДНК/РНК вірусу TIANamp (DP315)
● Висока ефективність: ДНК і РНК вірусу високої якості можна отримати шляхом швидкого очищення з високою повторюваністю.
● Висока чистота: Повне видалення забруднюючих речовин та інгібіторів для подальшого застосування.
● Висока безпека: Екстракція органічних реагентів або осадження етанолу не потрібні.
Рішення для виявлення вірусів РНК
1. Автоматизована система піпетування TEasy
● Висока точність: Охолоджуючий блок може підтримувати температуру зразка реагенту нижче 7 ℃ більше 60 хвилин. Кожен APM калібрується відповідно до міжнародних стандартів, що має більш високу точність, ніж ручне піпетування.
● Просте управління: невеликий розмір. Легка вага. Для заміни блоків не потрібен інструмент. Вбудована процедура підготовки до ПЛР/qPCR. Спрощена підготовка розчину для ПЛР вручну.
● Широке застосування: Може використовуватися для 96/384-лункових планшетних піпеток, ПЛР, qPCR, виявлення генів та інших високопродуктивних експериментів.
FastKing One Step RT-qPCR Kit (зонд) (FP314)
FastKing One Step RT-qPCR Kit (Probe) (FP314), розроблений компанією TIANGEN,-це одноступеневий метод кількісного виявлення флуоресценції зворотної транскрипції на основі методу зонду, який спеціально розроблений для виявлення генів слідів у різних зразках. KingRTase в наборі - це нова молекулярно модифікована зворотна транскриптаза, яка має більш сильну спорідненість до РНК і термічну стабільність, з покращеною ефективністю зворотної транскрипції та здатністю до розширення складних матриць РНК вторинної структури. Також застосовується нова ДНК -полімераза Taq з гарячим запуском, щоб надати реакції ПЛР вищу ефективність ампліфікації та специфічність. Крім того, набір максимально спрощує компоненти шляхом змішування Taq та ферменту MLV у суміш ферментів та попереднього змішування іонного буфера, dNTP, стабілізатора ПЛР та підсилювача у MasterMix, так що багатокомпонентні етапи змішування можуть бути
спрощено.
● Висока ефективність: Відмінна зворотна транскриптаза та ДНК -полімераза забезпечують високу ефективність реакції
● Хороша оборотність: Полімераза може зчитувати шаблон РНК з високим вмістом ГХ і складною вторинною структурою
● Широке застосування: висока придатність до шаблонів РНК з домішками різних видів
● Висока чутливість: шаблони від 1 нг можна точно ідентифікувати, особливо для шаблонів з низьким вмістом
Приклад визначення РНК -вірусу
Нуклеїнову кислоту пташиного грипу Н5 екстрагували набором магнітно -вірусної ДНК/РНК TGuide S32 (DP604). FastKing One Step RT-qPCR Kit (Probe) (FP314) був використаний для виявлення RT-qPCR з використанням специфічних праймерів та зондів пташиного грипу H5.
ABi7500Fast був використаний для виявлення RT-qPCR. Результати антигену вірусу пташиного грипу Н5 (розведення 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 та 10-7) із зразків 200 мкл показують високий вихід екстракції нуклеїнової кислоти вірусу, який може відповідати наступним потреби зворотної транскрипції, ПЛР, РТ-ПЛР, ПЛР у реальному часі тощо. ПЛР у реальному часі забезпечує результати з високою чутливістю, хорошою повторюваністю та хорошою лінійністю розведення градієнта. Можна точно виявити різні концентрації зразків вірусних нуклеїнових кислот.
Час публікації: 11 квітня-21 квітня