Комплект RNAclean

А-1 Лізису клітин або гомогенізації недостатньо

---- Зменшити використання зразків, збільшити кількість буфера для лізису, збільшити час гомогенізації та лізису.

A-2 Кількість вибірки надто велика

---- Зменшіть кількість використаного зразка або збільште кількість буфера для лізису.

А-1 Недостатній лізис або гомогенізація клітин

---- Зменшити використання зразків, збільшити кількість буфера для лізису, збільшити час гомогенізації та лізису.

A-2 Кількість вибірки надто велика

---- Будь ласка, зверніться до максимальної потужності обробки.

РНК А-3 не елююється повністю з колонки

---- Після додавання води без РНКази залиште її на кілька хвилин перед центрифугуванням.

А-4 Етанол в елюенті

---- Після промивання знову центрифугуйте і максимально видаліть промивний буфер.

А-5 Клітинне культуральне середовище видаляється не повністю

---- Під час збору клітин переконайтеся, що видаляєте поживне середовище, наскільки це можливо.

A-6 Клітини, що зберігаються в RNAstore, не ефективно центрифугуються

---- щільність РНК-сховища більша за середнє середовище культивування клітин; тому відцентрову силу слід збільшити. Рекомендується центрифугувати при 3000x g.

A-7 Низький вміст і кількість РНК у зразку

---- Використовуйте позитивну вибірку, щоб визначити, чи спричинена зразком низька врожайність.

A-1 Матеріал не свіжий

---- Свіжі тканини слід негайно зберігати у рідкому азоті або негайно помістити в реагент RNAstore для забезпечення ефекту екстракції.

A-2 Кількість вибірки надто велика

---- Зменшіть кількість вибірки.

Забруднення А-3 РНКазоюn

---- Хоча буфер, що входить до комплекту, не містить РНКази, під час процесу екстракції РНКазу легко забруднити, і з нею потрібно поводитися обережно.

А-4 Забруднення електрофорезом

---- Замініть буфер для електрофорезу та переконайтеся, що витратні матеріали та завантажувальний буфер вільні від забруднення РНКазою.

А-5 Занадто велике навантаження для електрофорезу

---- Зменшити кількість завантаження зразка, навантаження на кожну свердловину не повинно перевищувати 2 мкг.

A-1 Кількість вибірки надто велика

---- Зменшіть кількість вибірки.

A-2 Деякі зразки мають високий вміст ДНК і можуть бути оброблені ДНКазою.

---- Виконайте обробку ДНКази без РНКаз до отриманого розчину РНК, і РНК можна безпосередньо використовувати для подальших експериментів після обробки, або її можна додатково очистити за допомогою наборів для очищення РНК.

Для скляного посуду, випіканого при 150 ° С протягом 4 годин. Для пластикових контейнерів занурюють у 0,5 М NaOH на 10 хв, потім ретельно промивають водою без РНКази, а потім стерилізують для повного видалення РНКази. Реактиви або розчини, використані в експерименті, особливо вода, повинні бути вільними від РНКази. Для всіх препаратів з реагентами використовуйте воду без РНКази (додайте воду до чистої скляної пляшки, додайте DEPC до кінцевої концентрації 0,1% (об./Об.), Струсіть протягом ночі та автоклавуйте).