Набір циркулюючої ДНК сироватки/плазми

A-1 Низька концентрація клітин або вірусу у вихідному зразку-Збагачення концентрації клітин або вірусів.

А-2 Недостатній лізис зразків-зразки не були ретельно перемішані з буфером для лізису. Рекомендується ретельно перемішувати шляхом імпульсного вихрового перетворення 1-2 рази. —Недостатній лізис клітин, викликаний зниженням активності протеїнази К. —Недостатній лізис клітин або деградація білка через недостатній час теплого купання. Рекомендується розрізати тканину на невеликі шматочки і продовжити час ванни, щоб видалити весь залишок у лізаті.

А-3 Недостатня адсорбція ДНК. -Ніякого етанолу або низькопроцентного замість 100% етанолу не додавали до того, як лізат перенесли на спінову колонку.

A-4 Значення рН буфера для елюції надто низьке. -Налаштуйте рН між 8,0-8,3.

Залишок етанолу в елюенті.

—У елюенті є залишковий промивний буфер PW. Етанол можна видалити, центрифугуючи спінову колонку протягом 3-5 хвилин, а потім помістивши при кімнатній температурі або інкубаторі на 50 ℃ на 1-2 хвилини.

A-1 Зразок не свіжий. - Витягніть позитивну ДНК зразка як контроль, щоб визначити, чи деградувала ДНК у зразку.

А-2 Неправильна попередня обробка. - Викликано надмірним подрібненням рідкого азоту, відновленням вологи або надмірною кількістю зразка.

Попередні обробки повинні відрізнятися для різних зразків. Для зразків рослин ретельно подрібніть їх у рідкому азоті. Для зразків тварин гомогенізуйте або ретельно подрібніть у рідкому азоті. Для зразків із клітинними стінками, які важко зламати, таких як G+ бактерії та дріжджі, пропонується використовувати лізоцим, літиказу або механічні методи для руйнування клітинних стінок.

4992201/4992202 Комплект геномної ДНК рослин використовує метод на основі колонки, який вимагає хлороформу для екстракції. Він особливо підходить для різних зразків рослин, а також для сухого порошку рослин. Комплект рослин Hi-DNAsecure також базується на колонці, але не потребує екстракції фенолу/хлороформу, що робить його безпечним і нетоксичним. Він підходить для рослин з високим вмістом полісахаридів і поліфенолів. 4992709/4992710 Система DNAquick Plant використовує рідкий метод. Екстракція фенолу/хлороформу також не потрібна. Процедура очищення проста і швидка, без обмежень для початкової кількості зразка, тому користувачі можуть гнучко регулювати кількість відповідно до вимог експерименту. Великий розмір фрагментів гДНК можна отримати з високим виходом.

Геномну ДНК витягували з різних об’ємів зразків цільної крові людини за допомогою набору ДНК крові TIANamp. Результати такі. Результати вказані лише як довідкові, фактичні результати екстракції залежать від умов зразків.

Вилучення ДНК згустку крові можна здійснити за допомогою реагентів, що містяться в цих двох наборах, просто змінивши протокол на конкретну інструкцію щодо екстракції ДНК згустку крові. Потрібну копію протоколу екстракції ДНК згустку крові можна видати за запитом.

Суспендують свіжий зразок з 1 мл PBS, звичайним фізіологічним розчином або ТЕ -буфером. Повністю гомогенізуйте зразок гомогенізатором і збирайте осад на дно пробірки шляхом центрифугування. Утилізуйте надосадову рідину та ресуспендуйте осад з 200 мкл буферного ГА. Відповідно до інструкції можна провести наступне очищення ДНК.

Для очищення гДНК у зразках плазми, сироватки та рідини організму рекомендується набір мікро -ДНК TIANamp. Для очищення гДНК вірусу з зразків сироватки/плазми рекомендується набір ДНК/РНК вірусу TIANamp. Для очищення бактеріальної гДНК з зразків сироватки та плазми рекомендується набір ДНК TIANamp Bacteria DNA (для позитивних бактерій слід включити лізоцим). Для зразків слини рекомендується набір ДНК Hi-Swab та набір ДНК бактерій TIANamp.

Для вилучення геному гриба рекомендується набір рослинної системи DNAsecure Plant System або система DNAquick. Для вилучення геному дріжджів рекомендується набір ДНК дріжджів TIANamp (літиказу слід готувати самостійно).